检测限实验
什么时候测试变得不那么有用?Westgard博士从Karen Mugan、Elsa Quam、Trish Barry和Neill Carey那里得到了一些帮助，来解释方法验证的这个令人困惑的方面。(预览)
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注意:这个教训是从……中得出的第一个的版本基本方法验证书。这本参考手册现在已经出版了第三版。 自本课撰写以来，检测极限的协议和计算已经发生了重大变化。 该材料的更新版本也可在一个在线培训项目同时获得AACC和ASCLS认证。 |
目的
检测限实验旨在估计可测量的分析物的最低浓度。这种低浓度限制显然对法医药物测试感兴趣，因为药物的存在或不存在可能是测试所需的关键信息。低浓度下的分析性能对肿瘤标志物也很重要，如前列腺特异性抗原(PSA)，治疗后的患者值可能有助于监测“生化复发”[1]。
美国实验室法规要求仅对高复杂度方法、改进的中等复杂度方法和尚未被FDA批准为符合CLIA质量控制要求的中等复杂度方法进行检测限(或分析灵敏度)验证。鉴于FDA尚未实施QC审批流程，对中等复杂性方法的检测限进行验证的要求已被推迟。但是，在实施质量控制许可之前，良好实验室规范应规定在相关情况下验证检测限度，例如，所有法医和治疗药物测试;TSH和类似的免疫分析试验;PSA和其他癌症标志物，而不是葡萄糖，胆固醇，酶和成分，参考范围对测试结果的解释更相关。
这个领域的术语是一团糟!在他们的声明中，制造商经常使用各种各样的术语，如灵敏度、分析灵敏度、最低检测限、功能灵敏度、检测限和定量限。目前，这些术语还没有公认的标准定义，因此，有必要弄清楚实际的实验程序是什么，数据是如何计算的，如何从数据中做出估计，以及这种估计是否对该试验的医学应用有用。
需要考虑的因素
附图中提供了实验过程的一般描述。通常制备两种不同的样品。一个样品是“空白”，其感兴趣的分析物浓度为零。第二种是含有低浓度分析物的“加标”样品。在某些情况下，可以制备几种加标样品。空白样品和加标样品在重复实验中重复测量，然后通常根据样品的观察值计算平均值和SDs。根据空白样品和加标样品的数据可以计算出不同的检出限估计。
空白的解决方案。空白溶液的一个等分通常用于空白，另一个等分用于制备加标样品。理想情况下，空白溶液应具有与常规患者样品相同的基质。然而，通常使用一系列校准器中的“零标准”作为空白，并将最低标准作为“加标”样品。
尖的样本。在验证方法的性能时，添加到空白溶液中的分析物的量应代表制造商声称的检测浓度。在建立检出限时，通常需要制备几个加标样品，其浓度在预期检出限的分析范围内。对于某些检测，也可能有兴趣使用治疗后无疾病患者的样本(即前列腺癌治疗患者的PSA血清)[2]。
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